賽默飛液相色譜儀常用的4類檢測器介紹
賽默飛液相色譜儀根據固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。現代賽默飛液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點。對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實現分離。應用于生物化學、生物醫學、環境化學、石油化工等部門。
檢測器是賽默飛液相色譜儀的重要組成部分，液相色譜檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號，常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學發光等。
1、紫外吸收檢測器：是目前HPLC應用十分廣泛的檢測器。其工作原理是朗伯-比爾定律。這種檢測器靈敏度高，線性范圍寬，對流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫分離。紫外吸收檢測要求被檢測樣品組分有紫外-可見光吸收，而使用的流動相無吸收，或在被測組分吸收波長處無吸收。一般選擇在欲分析物有最大吸收的波長處進行檢測，以獲得最大靈敏度和抗干擾能力。在沒有最大吸收時，可采用末端吸收。檢測波長的選擇除取決于待測物質的成分和分子結構外，還必須考慮流動相組成、共存組分干擾等因素。特別是各種溶劑都有一定的透過波長下限值，超過這個波長，溶劑的吸收會變得很強，以至于不能很好地測出待測物質的吸收強度。下表列出了HPLC中一些常用的溶劑透過波長的下限。
2、熒光檢測器：是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產生熒光的化合物。熒光檢測器的原理與熒光分析法相同，化合物受紫外光激發后，發射出比激發光波長更長的光，稱為熒光或發射光。許多藥物和生命活性物質具有天然熒光,能直接檢測，某些不發熒光的物質可通過化學衍生化生成熒光衍生物，然后進行熒光檢測。其最小檢測濃度可達0.1ng/mL，適用于痕量分析。一般情況下，熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數量級，但其線性范圍不如紫外檢測器寬。近年來，采用激光作為熒光檢測器的光源而產生的激光誘導熒光檢測器增強了熒光檢測的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應用。
3、示差折光檢測器：是一種通用的濃度檢測器，對所有溶質都有響應。某些不能用選擇性檢測器檢測的組分，如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等，可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基于連續測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質進入另一種介質時，由于兩種物質的折射率不同就會產生折射。只要樣品組分與流動相的折光指數不同，就可被檢測，二者相差愈大，靈敏度愈高。在一定濃度范圍內檢測器的輸出與溶質濃度成正比。
4、化學發光檢測器：是近年來發展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器，具有設備簡單、價格低廉、線性范圍寬等優點。其原理是基于某些物質在常溫下進行化學反應，生成處于激發態勢反應中間體或反應產物，當它們從激發態返回基態時，就發射出光子。由于物質激發態的能量是來自化學反應，故叫作化學發光。當分離組分從色譜柱中洗脫出來后，立即與適當的化學發光試劑混合，引起化學反應，導致發光物質產生輻射，其光強度與該物質的濃度成正比。
這種檢測器不需要光源，也不需要復雜的光學系統，只要有恒流泵，將化學發光試劑以一定的流速泵入混合器中，使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產生化學發光，通過光電倍增管將光信號變成電信號，就可進行檢測。這種檢測器的最小檢出量可達10～12g。
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